Ārstniecībā izmantojamo medicīnisko tehnoloģiju datu bāze
Medicīniskā apaugļošana
-
Aktualizēts: 04.01.2016.
-
Medicīniskās apaugļošanas tehnoloģijas un to lietošanai nepieciešamais tehnoloģiskais nodrošinājums
-
I. Vispārīgie jautājumi
- 1. Medicīniskā apaugļošana ir vīrieša un sievietes dzimumšūnu mākslīga sapludināšana.
- 2. Pirms medicīniskās apaugļošanas ginekologa (dzemdību speciālista) pienākums ir informēt potenciālos vecākus par medicīniskās apaugļošanas būtību un iespējamiem sarežģījumiem, kā arī par ģenētiskiem un medicīniskiem sarežģījumiem, kas var rasties bērnam.
- 3. Medicīnisko apaugļošanu veic atbilstoši likumos un normatīvajos aktos noteiktajām prasībām.
- 4. Donors – persona, no kuras tiek iegūtas olšūnas vai spermatozoīdi nolūkā ievadīt šīs šūnas citai personai.
- 5. Donora dzimumšūnu banka – specializēta medicīniska nozare, kas nodarbojas ar donoru atlasi, viņu kontroli. Realizē donoru dzimumšūnu uzkrāšanu, glabāšanu un uzskaiti.
- 6. Donora dzimumšūnas, kas paredzamas medicīniskajai apaugļošanai, glabājas donora dzimumšūnu bankā.
- 7. Neauglība – dzimumbriedumu sasniegušu divu pretēju dzimumu personu nespēja radīt bērnu gada laikā, dzīvojot regulāru dzimumdzīvi bez kontracepcijas.
-
II. Termini un skaidrojumi
- 8. Olšūna – sievietes dzimumšūna:
- 8.1. folikuls – neliels, augošš pūslītis olnīcā, pildīts ar šķidrumu, kurā attīstās olšūna;
- 8.2. olnīcu stimulācija – medikamentozu hormonālu preparātu ievadīšana sievietes organismā, kas veicina folikulu un olšūnu nobriešanu;
- 8.3. ovulācija – folikula plīšana, kuras rezultātā olšūna izkļūst no olnīcas;
- 8.4. folikulu punkcija – operācija, kuru izdara olnīcu stimulācijas beigās, lai no olnīcu folikuliem iegūtu olšūnas.
- 9. Spermatozoīds – vīrieša dzimumšūna:
- 9.1. sperma – sēklas šķidrums, kurā atrodas spermatozoīdi:
- 9.1.1 oligoastenoteratozoospermija – spermas patoloģija, kuras gadījumā ir pazemināta spermatozoīdu koncentrācija, samazināts spermatozoīdu kustīgums un to morfoloģija neatbilst kritērijiem;
- 9.1.2. oligospermija – spermatozoīdu koncentrācija ejakulātā - spermas porcijā, mazāka nekā 20 milj./ml.;
- 9.1.3. azoospermija – spermas šķidrumā nav spermatozoīdu.
- 9.1. sperma – sēklas šķidrums, kurā atrodas spermatozoīdi:
- 10. Inseminācija – sagatavotu spermatozoīdu pārnešana dzemdes dobumā.
- 11. Fertilizācija – apaugļošanās. Tā notiek, kad spermatozoīds iekļūst olšūnā un nodod tai savu ģenētisko informāciju.
- 12. Mākslīga apaugļošana mēģenē (IVF – starptautiski pieņemts saīsinājums no in vitro fertilization).
- 13. Intracelulāra viena spermatozoīda injekcija olšūnā (ICSI - starptautiski pieņemts saīsinājums no intracitoplasmatic sperm injection).
- 14. Cilvēka embrijs – rodas apaugļotas olšūnas dalīšanās rezultātā. Par embriju jeb dīgli dēvē cilvēka aizmetni līdz 8.grūtniecības nedēļai.
- 15. Embriotransfērs (ET – embriju ievadīšana dzemdes dobumā caur dzemdes kaklu ar speciālu katetru).
-
III. Nosacījumi medicīniskās apaugļošanas pielietojumam
- 16. Indikācijas ārpusķermeņa apaugļošanai mēģenē (IVF):
- 16.1. sievietes neauglība:
- 16.1.1. sievietei nav olvadu (pēc operācijām, iedzimta patoloģija);
- 16.1.2. olvadu caurlaidība traucēta vai tie pilnīgi slēgti;
- 16.1.3. ja nav iestājusies grūtniecība gada laikā pēc mikroķirurģiskas olvadu operācijas;
- 16.1.4. hormonālas izcelsmes neauglība;
- 16.1.5. ovulācijas traucējumi, ja ovulācijas stimulācija nav devusi rezultātus;
- 16.1.6. idiopātiska neauglība;
- 16.1.7. imunoloģiska neauglība;
- 16.1.8. endometrioze (ja gada laikā pēc endometriozes ārstēšanas nav iestājusies grūtniecība);
- 16.1.9. dažāda veida konservatīva vai operatīva neauglības ārstēšanas metode, pēc kuras gada laikā nav iestājusies grūtniecība.
- 16.2. vīrieša neauglība:
- 16.2.1. vieglas formas asteno- un teratozoospermija, ja spermatozoīdu koncentrācija ir pietiekama IVF procedūrai.
- 16.1. sievietes neauglība:
- 17. Indikācijas intracitoplazmātiskai viena spermatozoīda injekcijai olšūnā (ICSI):
- 17.1. sievietes neauglība:
- 17.1.1. ļoti mazs iegūto olšūnu skaits, kas iegūts ar folikulu punkciju;
- 17.1.2. ļoti neliels olšūnu fertilizācijas vai apaugļošanās procents iepriekšējā IVF procedūrā - mazāk nekā 20-25%;
- 17.1.3. imunoloģiska neauglība, kas noris ar izteiktu spermatozoīdu aglutināciju.
- 17.2. vīrieša neauglība:
- 17.2.1. oligoastenoteratozoospermija vidēji smagas un smagas formas:
- 17.2.1.1. spermatozoīdu koncentrācija – mazāka par 5 milj./ml.;
- 17.2.1.2. spermatozoīdu kustīgums – mazāks par 25%;
- 17.2.1.3. spermatozoīdu morfoloģija – mazāka par 6%;
- 17.2.2. azoospermija:
- 17.2.2.1. azoospermijas obstruktīvā forma;
- 17.2.2.2. azoospermijas neobstruktīvā forma.
- 17.2.1. oligoastenoteratozoospermija vidēji smagas un smagas formas:
- 17.1. sievietes neauglība:
- 18. Indikācijas donora spermas izmantošanai:
- 18.1. smagas oligoastenoteratozoospermijas formas;
- 18.2. azoospermijas neobstruktīvās formas (spermatoģenēzes apstāšanās dažādās attīstības stadijās);
- 18.3. ja nav iespējams iegūt spermatozoīdus no sēkliniekiem punkcijas rezultātā;
- 18.4. azoospermijas destruktīvās formas;
- 18.5. staru slimība un staru terapija, lietota vīrietim;
- 18.6. vīrieša ģenētiskas saslimšanas;
- 18.7. smaga rēzus faktora nesaderība;
- 18.8. atkārtoti nesekmīgi ICSI gadījumi;
- 18.9. sievietes bez partnera.
- 19. Indikācijas inseminācijai:
- 19.1. sievietes neauglība:
- 19.1.1. dažāda veida konservatīva neauglības ārstēšanas metode, pēc kuras gada laikā nav iestājusies grūtniecība;
- 19.2. vīrieša neauglība:
- 19.2.1. vieglas formas asteno- un teratozoospermija;
- 19.2.2. anspermālās antivielas;
- 19.2.3. seksuālās disfunkcijas.
- 20. Indikācijas olnīcu stimulācijai:
- 20.1. sievietes neauglība:
- 20.1.1. anovulācija (neveidojas folikuļi);
- 20.1.2. sagatavošana IVF;
- 20.1.3. sagatavošana ICSI.
- 20.1. sievietes neauglība:
- 21. Indikācijas donoru olšūnu un donoru embriju izmantošanai:
- 21.1. iedzimta olšūnu patoloģija;
- 21.2. iegūta olnīcu mazspēja (pēc staru un ķīmijterapijas);
- 21.3. liels risks, ka bērns pārmantos no mātes ģenētisku slimību;
- 21.4. pacienta vecums virs 40 gadiem, kad pēc ovulācijas stimulēšanas neizdodas iegūt olšūnas;
- 21.5. neizskaidrojama vairāku grūtniecību spontāna pārtraukšana;
- 21.6. vairākkārtīgi stimulējot ovulāciju, nav izdevies iegūt olšūnu.
- 22. Dzimumšūnu donora izvēle:
- 22.1. par dzimumšūnu donoru var būt vesela persona: vīrietis vecumā no 18 līdz 45 gadiem un sieviete vecumā no 18 līdz 35 gadiem;
- 22.2. potenciālais dzimumšūnu donors tiek medicīniski izmeklēts.
-
IV. Medicīniskās apaugļošanas tehnoloģijas
- 23. Dzimumšūnu donora izmeklēšana pirms medicīniskās apaugļošanas tehnoloģiju lietošanas:
- 23.1. fiziska un lokāla izmeklēšana;
- 23.2. laboratoriskie izmeklējumi:
- 23.2.1. sievietēm – mātēm un olšūnu donorēm:
- 23.2.1.1. asins grupas, rēzus faktora noteikšana;
- 23.2.1.2. seksuāli transmisīvo slimību, sifilisa, HIV, B un C hepatīta, gonorejas, trihomonozes, toksoplazmozes, mikoplazmas infekcijas, ureaplazmas infekcijas, diagnostika;
- 23.2.1.3. hormonāla izmeklēšana 2. vai 3. menstruālā cikla dienā – folikulstimulējošā hormona, lutinizētājhormona hormona, estradiola līmeņa noteikšana;
- 23.2.1.4. hormonāla izmeklēšana 20. – 22. menstruālā cikla dienā – prolaktīna, progesterona, testosterona, tireotropā hormona, trijodtironīna, tiroksīna līmeņa noteikšana;
- 23.2.2. vīriešiem – tēviem un spermas donoriem:
- 23.2.2.1. spermogramma;
- 23.2.2.2. seksuāli transmisīvo slimību, sifilisa, HIV, B un C hepatīta, gonorejas, trihomonozes, toksoplazmozes, mikoplazmas infekcijas, ureaplazmas infekcijas, diagnostika.
- 23.2.1. sievietēm – mātēm un olšūnu donorēm:
- 23.3. In vitro apaugļošanās (IVF) ceļā iegūtu embriju bioloģiskā materiāla sagatavošana preimplantācijas ģenētiskai diagnostikai (PGD). (Pielikums) MT 15-023
- 24. Spermas sasaldēšana un atsaldēšana:
- 24.1. spermas sasaldēšana:
- 24.1.1. spermai ļauj sašķidrināties 30 minūtes istabas temperatrūrā, aizpilda spermas uzglabāšanas protokolu;
- 24.1.2. sajauc spermu ar sasaldēšanas vidi attiecībā 1:1, lēni pie spermas pilinot klāt sasaldēšanas vidi 10 minūšu laikā;
- 24.1.3. sagatavoto maisījumu pārnes sasaldēšanas stobriņos 0,5 ml katrā stobriņā;
- 24.1.4. stobriņu ievieto turētājstobrā un inkubē +4˚C temperatūrā 30 minūtes;
- 24.1.5. inkubē -18˚C temperatūrā 30 minūtes;
- 24.1.6. stobriņus inkubē slāpekļa tvaikos 30 minūtes;
- 24.1.7. stobriņus iegremdē šķidrā slāpeklī;
- 24.2. spermas atsaldēšana:
- 24.2.1. stobriņu ar sasaldētu spermu izņem no slāpekļa un tur istabas temperatūrā 1 minūti;
- 24.2.2. stobriņu ievieto 37˚C ūdens vannā un spermu atsaldē.
- 24.1. spermas sasaldēšana:
- 25. Embriju sasaldēšana un atsaldēšana:
- 25.1. embriju sasaldēšana:
- 25.1.1. Nunc četru ailīšu platē, pa vienai ailītei no katra, ienes 0,5 ml F1, F2 un F3 šķīdumus un sasilda līdz istabas temperatūrai;
- 25.1.2. ar mikrokapilāru pārnes embrijus uz F1, inkubē 5minūtes;
- 25.1.3. pārnes embrijus uz F2, inkubē 10 minūtes;
- 25.1.4. pārnes embrijus uz F3 un iesūc sasaldēšanas salmiņā ar 1ml šļirci. Iesūc 2 cm barotni, gaisa burbulis, 2cm barotnes ar embrijiem, gaisa burbulis, barotne līdz stobriņš pilns;
- 25.1.5. aizkorķē stobriņu un sāk sasaldēšanas programmu;
- 25.1.6. pēc sasaldēšanas stobriņu pārnes turētājstobriņā un iegremdē šķidrā slāpeklī;
- 25.2. embriju atsaldēšana:
- 25.2.1. sagatavo Nunc plati ar TM1, TM2, TM3, un IVF Medium šķīdumiem, katrā ailītē 0,5 ml (šķīdumiem jābūt istabas temperatūrā);
- 25.2.2. izņem salmiņu no šķidrā slāpekļa un 30 sekundes tur gaisā;
- 25.2.3. ievieto salmiņu +30˚C ūdens vannā 30 sekundes;
- 25.2.4. nogriež salmiņa galu un tam pievieno 1 ml šļirci;
- 25.2.5. nogriež salmiņa otru galu un uzmanīgi kontrolējot binokulārajā lupā, ienes embrijus TM1 šķīdumā;
- 25.2.6. inkubē 5 minūtes;
- 24.2.7. ar mikrokapilāru pārnes embrijus uz TM2 šķīdumu un inkubē 5 minūtes;
- 25.2.8. pārnes embrijus uz TM3 un inkubē 5 minūtes;
- 25.2.9. pārnes embrijus uz IVF Medium un inkubē 5 minūtes;
- 25.2.10. novērtē embrijus mikroskopā (embriji derīgi embriotransfēram, ja vismaz 50% no šūnām pēc atsaldēšanas ir dzīvas);
- 25.2.11. veic embriotransfēru vai turpina kultivēt vienu dienu, ja embrijs turpina dalīties.
- 25.1. embriju sasaldēšana:
- 26. Spermas iegūšana un sagatavošana mākslīgai apaugļošanai:
- 26.1. spermas iegūšana no dzimumšūnu donora;
- 26.2. nesasaldētas spermas sagatavošana:
- 26.2.1. sw up metode – izmanto, ja spermas kvalitātes rādītāji ir labi;
- 26.2.2. spermatozoīdu izolēšana blīvuma gradientā - izmanto, ja spermas kvalitātes rādītāji ir slikti;
- 26.3. sasaldētas spermas sagatavošana analoģiski 23.2.punktā norādītajam.
- 27. Inseminācija:
- 27.1. ar vai bez olnīcu stimulācijas, inducējot ovulāciju un laikā sinhronizējot insemināciju ar ovulāciju;
- 27.2. spermas sagatavošana analoģiski 23.2. vai 25.punktā norādītajam;
- 27.3. spermatozoīdu izolēšana;
- 27.4. spermatozoīdu instrumentāla ievadīšana sievietes dzemdē ultrasonoskopiskā kontrolē:
- 27.4.1. pacientes urīnpūšļa uzpildīšana;
- 27.4.2. izolēto spermatozoīdu instrumentāla ievadīšana sievietes dzemdē, izmantojot intrauterīnās inseminācijas katetru.
- 28. Mākslīga apaugļošana mēģenē (IVF):
- 28.1. spermas sagatavošana analoģiski 23.2. vai 25.punktā norādītajam;
- 28.2. spermatozoīdu izolēšana;
- 28.3. olšūnu iegūšana:
- 28.3.1. olnīcu stimulācija izmantojot ģenētiski rekombinētos folikulostimulējošo hormonu preparātus ;
- 28.3.2. olnīcu folikulu punkcija;
- 28.3.3. olšūnu attīrīšana no kumulus šūnām:
- 28.4. mākslīga apaugļošana:u iapaug
- 28.4.1. apaugļošanas barotnes sagatavošana;
- 28.4.2. spermatozoīdu sapludināšana ar barotnes pilieniem;
- 28.4.3. olšūnu sapludināšana ar spermatozoīdiem barotnes pilienos;
- 28.4.4. apaugļošanas inkubācija;
- 28.5. apaugļošanas novērtēšana;
- 28.6. embriju novērtēšana:
- 28.6.1. invertā mikroskopiskā embriju dalīšanās novērtēšana;
- 28.6.2. kvalitatīvāko embriju atlase embriotransfēram;
- 28.7. embriotransfērs (ET):
- 28.7.1. pacientes urīnpūšļa uzpildīšana;
- 28.7.2. ultrasonogrāfiska attāluma noteikšana no cervikālā kanāla ārējās atveres līdz embrija ievadīšanas vietai dzemdē;
- 28.7.3. apaugļotās olšūnas ievadīšana sievietes dzemdē, izmantojot embriotransfēra katetru, ultrasonoskopiskā kontrolē;
- 28.8 atlikušo kvalitatīvo embriju sasaldēšana, ja ir vairāk embriju kā nepieciešams embriotransfēram, analoģiski 24.punktā norādītajam.
- 29. Intracelulāra viena spermatozoīda injekcija olšūnā (ICSI):
- 29.1. spermas sagatavošana analoģiski 23.2. vai 25.punktā norādītajam;
- 29.2. spermatozoīdu izolēšana;
- 29.3. olšūnu iegūšana:
- 29.3.1. olnīcu stimulācija izmantojot ģenētiski rekombinētos folikulostimulējošo hormonu preparātus;
- 29.3.2. olnīcu folikulu punkcija;
- 29.3.3. olšūnu attīrīšana no kumulus šūnām;
- 29.4. mākslīga apaugļošana:
- 29.4.1. apaugļošanas barotnes sagatavošana;
- 29.4.2. intracitoplazmātiska mikroinjekcija olšūnā un viena spermatozoīda sapludināšana ar olšūnas citoplazmu;
- 29.4.3. apaugļošanas inkubācija;
- 29.5. apaugļošanas novērtēšana;
- 29.6. embriju novērtēšana:
- 29.6.1. invertā mikroskopiskā embriju dalīšanās novērtēšana;
- 29.6.2. kvalitatīvāko embriju atlase embriotransfēram;
- 29.7. embriotransfērs (ET) analoģiski 27.6. punktā norādītajam;
- 29.8. atlikušo kvalitatīvo embriju sasaldēšana, ja ir vairāk embriju kā nepieciešams embriotransfēram, analoģiski 24.punktā norādītajam.
-
V. Mākslīgās apaugļošanas tehnoloģiju pielietojumam nepieciešamie resursi
- 30. Medicīnisko apaugļošanu veic veselības aprūpes jomu regulējošo normatīvo aktu noteiktā kārtībā izvērtētā un obligātām prasībām atbilstošā ārstniecības iestādē:
- 30.1. ambulatorās iestādes dienas stacionārā;
- 30.2. stacionārā ārstniecības iestādē.
- 31. Iesaistītie speciālisti:
- 31.1. sertificēts ginekologs (dzemdību speciālists) – veic sievietes dzimumorgānu izmeklēšanu, olnīcu stimulāciju ultrasonoskopijas un hormonālo izmeklējumu kontrolē, olnīcu punkciju un embriju ievadīšanu dzemdē ultrasonoskopijas kontrolē;
- 31.2. sertificēts urologs – veic vīrieša dzimumorgānu izmeklēšanu, kad tas nepieciešams, vīrieša fertilitātes novērtēšanu veicot spermas analīzi, testis punkciju, ja tas nepieciešams;
- 31.3. embriologs – veic dzimumšūnu izolāciju, aktivāciju, apaugļošanu un embriju kultivēšanu in vitro, sagatavo embrijus pārnešanai sievietes dzemdē vai olvadā, kā arī veic embriju sasaldēšanu vai atsaldēšanu.
- 32. Telpu nodrošinājums:
- 32.1. telpa ginekoloģiskām apskatēm, inseminācijām un ultrasonoskopiskai izmeklēšanai;
- 32.2. procedūru telpa, kurā aseptiskos apstākļos veic olnīcu folikulu punkciju un embriju pārnešanu dzemdē ultrasonoskopijas kontrolē;
- 32.3. laboratorija – telpa, kurā aseptiskos apstākļos veic visus darbus ar dzimumšūnām un embrijiem;
- 32.4. telpa, kurā uzglabā sasaldētas dzimumšūnas, embrijus un šķidrā slāpekļa konteinerus.
- 33. Medicīniskās ierīces:
- 33.1. ultraskaņas izmeklēšanas aparāts ar abdominālo un vaginālo zondi;
- 33.2. vaginālās zondes adapteris un marķētas adatas olnīcu folikulu punkcijai;
- 33.3. laminārās plūsmas skapis ar filtrētu (sterilu) gaisa plūsmu;
- 33.4. CO2 termostats ar 37˚C temperatūru (pieļaujamā novirze 0,1˚C) un CO2 5% koncentrāciju (pieļaujamā novirze 0,1%);
- 33.5. centrifūga ar 1500 apgr./min.;
- 33.6. lupa ar apsildāmu (37˚C) galdiņa virsmu;
- 33.7. invertētais mikroskops ar maksimālo palielinājumu līdz 400 reizēm, Hofmaņa modulācijas sistēmu un apsildāmu (37˚C) virsmu;
- 33.8. antivibrācijas galds;
- 33.9. mikromanipulātors intracitoplazmātisku mikroinjekciju veikšanai;
- 33.10. šūnu sasaldēšanas aparatūra ar programmējamu temperatūras pazemināšanu no +25˚C līdz -80˚C;
- 33.10.1. sasaldēšanas salmiņi un aizbāžņi;
- 33.10.2. sasaldēšanas kapsulas;
- 33.10.3. Nunc plate;
- 33.11. šķidrā slāpekļa uzglabāšanas un transporta trauki;
- 33.12. sterili vienreizējas lietošanas plastmasas trauki un pipetes;
- 33.13. automātiskās mikropipetes: 0,5-10ul, 20-200ul, 200-1000ul;
- 33.14. sterili stikla un plastmasas kapilāri;
- 33.15. sterili šķīdumi šūnu kultivēšanai.